15L氣升式外環(huán)流發(fā)酵罐操作規(guī)程

無(wú)菌空氣系統(tǒng)準(zhǔn)備

1、開(kāi)啟空氣壓縮機(jī)和冷凍干燥機(jī)，給系統(tǒng)供風(fēng)。

2、定時(shí)開(kāi)啟空氣預(yù)過(guò)濾器（空氣冷凍干燥機(jī)前）和空氣貯罐的排水閥排水。

3、將空氣壓力減至0.3Mpa（表），再進(jìn)入空氣總過(guò)濾器（5英寸過(guò)濾器，不進(jìn)行熱蒸汽消毒），避免超壓引起事故。

4、開(kāi)啟蒸汽總閥，使蒸汽壓力表指示在0.3MPa(表)，開(kāi)啟蒸汽過(guò)濾器前的閥，供干凈蒸汽給空氣過(guò)濾器進(jìn)行蒸汽消毒，關(guān)閉JPF空氣過(guò)濾器（小過(guò)濾器）進(jìn)空氣閥、打開(kāi)進(jìn)蒸汽閥，打開(kāi)排污閥，開(kāi)始給JPF消毒。

5、調(diào)整各進(jìn)出汽閥的開(kāi)度，使JPF過(guò)濾器表壓保持在0.12Mpa～0.15MPa，維持20分鐘，將蒸汽切換成空氣，即快速關(guān)閉進(jìn)蒸汽閥、開(kāi)啟進(jìn)空氣閥，將空氣過(guò)濾器吹干。

6、調(diào)節(jié)進(jìn)空氣閥和排污閥，使過(guò)濾器表壓在0.2～0.25Mpa，吹氣15分鐘，關(guān)排污閥，關(guān)閉出空氣閥，保持JPF過(guò)濾器壓力表指示在0.2～0.25Mpa。過(guò)濾器無(wú)菌空氣進(jìn)入備用狀態(tài)。

空罐消毒

1、排放干凈發(fā)酵罐中液體。

2、開(kāi)啟夾套排水閥（3），排放干凈夾套中水，并保證冷凝水排放暢通。

3、開(kāi)啟蒸汽總閥（5）、蒸汽進(jìn)夾套閥（10）向夾套通蒸汽，給發(fā)酵罐間接加熱。

4、開(kāi)啟放料管路蒸汽閥（1）和發(fā)酵罐放料閥（19），關(guān)閉轉(zhuǎn)子流量計(jì)與空氣過(guò)濾器之間的閥門(mén)（2）。開(kāi)啟空氣進(jìn)管上的蒸汽閥（8，9）（蒸汽過(guò)濾器前后的閥）；兩路蒸汽向發(fā)酵罐直接蒸汽加熱。

5、始終打開(kāi)排汽閥（12）排汽，當(dāng)有大量蒸汽逸出時(shí)，適當(dāng)關(guān)小排汽閥（12，1）。

6、調(diào)節(jié)各進(jìn)汽閥（5，9，10）和排汽閥（12，1）開(kāi)關(guān)度，使發(fā)酵罐溫度維持在121℃，罐壓維持在0.1Mpa，保溫20分鐘。

7、保溫時(shí)間一到，關(guān)閉各進(jìn)蒸汽閥（5，9，10），但絕對(duì)不允許同時(shí)關(guān)閉排汽閥（12，1），以免造成由于發(fā)酵罐內(nèi)或夾套內(nèi)氣體冷縮形成真空，吸癟容器。此時(shí)宜將排汽閥開(kāi)大，保證容器內(nèi)外壓力平衡。

8、發(fā)酵罐可以自然冷卻，也可以開(kāi)啟夾套進(jìn)水閥（14，15，16）和夾套排水閥（4），通過(guò)由夾套進(jìn)行發(fā)酵罐冷卻。

9、開(kāi)啟進(jìn)空氣閥，給發(fā)酵罐進(jìn)適量的無(wú)菌空氣，給發(fā)酵罐保壓0.05Mpa，以等待進(jìn)料。

10、空罐消毒將pH、DO電極取出，放入緩沖液中。

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實(shí)罐消毒

1、插入pH、DO電極，保證擰緊無(wú)泄漏，關(guān)閉發(fā)酵罐放料閥（19）、開(kāi)啟進(jìn)料口（11）（本反應(yīng)器與接種口合用），通過(guò)漏斗將加熱至一定溫度的料液加入發(fā)酵罐中。

2、開(kāi)啟夾套排水閥（3），排凈夾套中水，并保證冷凝水排放暢通。

3、開(kāi)啟蒸汽總閥（5）與夾套進(jìn)汽閥（6）向夾套加蒸汽，給發(fā)酵液間接加熱至90～100℃,關(guān)閉轉(zhuǎn)子流量計(jì)與空氣過(guò)濾器之間的閥門(mén)（2）。

4、開(kāi)啟發(fā)酵罐排料閥旁的蒸汽閥（10），關(guān)閉底閥（1），打開(kāi)排料閥（19），給發(fā)酵液進(jìn)行直接蒸汽加熱，同時(shí)開(kāi)啟空氣進(jìn)管上的蒸汽閥（7，8，9）（包括蒸汽過(guò)濾器前后的閥）；兩路蒸汽向發(fā)酵罐直接蒸汽加熱。

5、調(diào)節(jié)各進(jìn)汽閥（5，9，10）和排汽閥開(kāi)度（12），使發(fā)酵液溫度維持在121℃，罐壓維持在0.1Mpa，保溫時(shí)間15分鐘。

6、保溫時(shí)間一到，立即關(guān)閉各進(jìn)蒸汽閥（5，9，10），同時(shí)開(kāi)啟進(jìn)空氣閥（18，2），將無(wú)菌空氣切換進(jìn)發(fā)酵罐，此時(shí)通風(fēng)量應(yīng)較小，控制好罐壓，以免泡沫冒罐逃液。自此之后，要保證發(fā)酵罐始終處于正壓狀態(tài)（P_表≥0.05Mpa）。

7、以最快速度關(guān)閉夾套進(jìn)蒸汽閥（6）和夾套排冷凝水閥（3），開(kāi)啟冷卻水進(jìn)夾套閥（16）給夾套進(jìn)水，開(kāi)啟電磁閥的旁通閥(4)排冷卻水，將發(fā)酵液溫度迅速冷卻至40℃，滅菌與降溫過(guò)程，發(fā)酵罐與恒溫水控溫智能表始終開(kāi)啟，監(jiān)測(cè)整個(gè)過(guò)程溫度變化。

8、等發(fā)酵罐溫降至35℃左右，關(guān)閉排冷卻水旁路閥(4)，將發(fā)酵罐切換到自動(dòng)控溫狀態(tài)（參考發(fā)酵過(guò)程控制系統(tǒng)《用戶手冊(cè)》）。

9、調(diào)節(jié)進(jìn)空氣與排氣閥使空氣流量計(jì)指示在工藝要求值，使發(fā)酵罐壓維持在0.08～0.1Mpa，等待接種。

10、接種前對(duì)DO電極量程進(jìn)行校正。pH電極、DO電極在插入前進(jìn)行校準(zhǔn)。

注意：

1、蒸汽消毒時(shí)，由于反應(yīng)器升液管與降液管冷熱不勻，可能造成震動(dòng)和響聲，屬正常現(xiàn)象，若震蕩太大，可以考慮用空氣輔助帶動(dòng)循環(huán)。

2、空罐消毒時(shí)，一定不能將發(fā)酵罐進(jìn)出汽口的閥全部關(guān)死，或出汽閥關(guān)得太小，以免形成真空造成發(fā)酵罐真空破壞。